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山东试剂常用生化试剂

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山东试剂常用生化试剂

发布日期:2017-03-31 作者: 点击:

山东试剂


山东试剂常用生化试剂作用 

1。蛋白酶K:  

能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白。再尿素和SDS中稳定。一般工作浓度是50—100μg/ml,推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7。5),10mM CaCl2。 

2.SDS:  

十二烷基硫酸钠. 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀 

3。IPTG       

异丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于蓝白斑筛选及IPTG诱导的细菌内的蛋白表达等. IPTG和乳糖的结构相似,所以它和乳糖一样,可以与乳糖操纵元的阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白的空间构像变化,四聚体解聚成单体,失去与操纵子特异性结合的能力,从而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以转录合成利用乳糖的酶类。与乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常与X-GAL一起用于蓝白斑筛选。作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定 

4.X-gal  5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的显色试剂,在IPTG的催化下显蓝色。常跟IPTG一起用与蓝白斑筛选。 

5。G418:       

一种抗生素,对几乎所有的细胞都有毒性,是稳定转染最常用的选择试剂。当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。G418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。 

6。DMSO        

二甲基亚砜。实验室常用于作液体层析溶剂,同时用作测试物质紫外消光值上时用作参照物。能溶于所有烷烃和烯烃。 

7.曲拉通X-100  TritonX-100.用的细胞裂解液成分之一,在保护蛋白活性方面有一定作用. 能力介于NP40和SDS之间,偏向于NP40 8.NP-40        

很温和的去垢剂,1%浓度的基本可以破坏掉胞膜,而对核膜破坏的作用弱,结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。 9BSA  牛血清白蛋白。 主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。常用于蛋白定量中的内参和抗体稀释液。 

10.甲酰胺       

甲酰胺被用作凝胶电泳中RNA的稳定剂,也用于稳定毛细管电泳中的变性单股DNA。  

11.TEMED         

四甲基乙二胺。促凝剂。在中性及碱性pH条件下,加入TEMED可加速凝胶聚合 

12。巯基乙醇         

一种强还原剂。可还原蛋白二硫键,从而使蛋白保持溶解状态,有利于与SDS的结合。使蛋白解离成单个亚基。 


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