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细胞外RNA提取试剂盒究竟哪家强?

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细胞外RNA提取试剂盒究竟哪家强?

发布日期:2017-04-08 作者: 点击:

商品化的试剂盒能简化和加速exRNA提取过程,已成为循环exRNA研究不可缺少的工具。然而,细胞外RNA提取试剂盒的提取效率如何,是否能去除血浆中的污染物,是否会偏向特定的RNA,都没有经过评估,而这类评估对于结果解释和实验之间的比较都很关键。

细胞外RNA(exRNA)已成为研究界的新宠。近年来,人们在血浆或血清样本中成功检测到疾病相关的exRNA,使其有望成为非侵入性的生物标志物。然而,从血浆或血清中分离exRNA仍颇具挑战性,这一方面是因为exRNA丰度低,另一方面是因为血液中的污染物会抑制PCR。生物通 www。ebiotrade。com 

商品化的试剂盒能简化和加速exRNA提取过程,已成为循环exRNA研究不可缺少的工具。然而,这些试剂盒的提取效率如何,是否能去除血浆中的污染物,是否会偏向特定的RNA,都没有经过评估,而这类评估对于结果解释和实验之间的比较都很关键。

RNA提取试剂盒

于是,美国爱因斯坦医学院的研究人员评估了市场上7种常用的exRNA提取试剂盒,分别来自贝克曼•库尔特、Life Technologies、Exiqon、Zymo、QIAGEN公司。他们具体评估了合成RNA的总体回收率、不同大小的合成RNA的回收能力、exRNA产量和纯度,以及纯化后的扩增效率。研究结果发表在《BioTechniques》7月刊上。

在评估总体回收率和大小偏向时,研究人员使用了6种合成的RNA,其长度在200-6000 nt。他们发现,所有试剂盒的回收率都在50%以上。其中,Zymo的两款试剂盒回收率最高,在80%以上。大部分试剂盒都很好地回收了所有长度的RNA,不过miRCURY-Biofluids试剂盒在4000-6000 nt RNA上有明显的损失。这与试剂盒分离<1000 nt RNA的说明一致。生物通 www.ebiotrade.com 

为了比较试剂盒在血浆exRNA纯化上的表现,研究人员利用每个试剂盒进行三次重复提取,之后利用Qubit定量。结果显示,miRCURY-Biofluids、Quick-RNA以及mirVana试剂盒的每毫升血浆的exRNA产量都在30-40 ng,DirectZol和miRNeasy试剂盒在10 ng左右,而MagMAX试剂盒仅产生了4.1 ng exRNA。此外,RNAdvance试剂盒的产量特别高,这可能是由于裂解液污染。

为了评估从纯化的exRNA中扩增RNA的能力,研究人员开展了RT-PCR反应,扩增hsa-miR-16、hsa-miR-150、GAPDH和ACTB。他们发现,利用miRNeasy试剂盒分离出的RNA,很容易扩增出miRNA和mRNA。不过,有些试剂盒在miRNA扩增上表现良好,但却无法扩增mRNA;而有的试剂盒正相反,在mRNA扩增上表现良好。生物通 www.ebiotrade.com 

这项研究表明,尽管这些试剂盒在回收合成RNA上的总体表现不错(回收率≥50%),但一些表现出RNA长度的偏向。血浆的exRNA产量因试剂盒而异,但一些试剂盒可能引入污染。此外,exRNA样品的RT-PCR扩增差异明显,部分原因是样品中存在抑制剂。

最关键的是,大多数试剂盒纯化出的exRNA样品都表现出特定RNA种类的扩增偏向,如Quick-RNA偏向mRNA,而DirectZol偏向miRNA。因此,作者认为,不同试剂盒在不同程度上反映了血浆exRNA的内容,相互之间难以比较。这一发现也有助于解释为何exRNA结果缺乏重复性。

青岛科尚生物有限公司成立于2009年,由山东农业大学农学院06级硕士毕业生创办,“登高必自”乃农大校训,严以律己的农大人恪守农大校训,干事创业既有“登高”的目标,志存高远,敢想敢干,又从“自卑”处开始,脚踏实地,循序渐进。集中体现了努力攀登、坚韧不拔的泰山精神,勤劳勇敢、自强不息的中华民族精神和山东人民质朴务实、埋头苦干的实干精神。经过几年的发展与累积,公司目前拥有一支规范、创新、公正、尽责的专业团队,他们真情为客户,务实有担当,忠诚奉献科研事业。专业是我们的优势,我们将优势发挥到极致。诚信是我们的宗旨,我们把宗旨贯穿永恒。

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2011年泰安科尚生物正式签约北京康为世纪有限公司,在泰安市场该品牌空白的前提下以年销售额200%的增长速率,连续三年销售额全国排名第二并荣获康为世纪最佳代理商称号。2014年泰安科尚生物成为中科美菱超低温、科研用低温冰箱的签约代理商并超额完成签约任务。2015年与美国梅特勒托利多旗下瑞宁移液器正式合作,成为该品牌在山东的一级签约代理。同年与Thermo Fisher公司旗下ABI品牌合作并成功销售荧光定量PCR仪拾台,测序仪两台,将山东农业大学的名声在Thermo Fisher公司内部打响,让其对农大的实力刮目相看。目前公司独家签约代理品牌:北京康为世纪核酸蛋白类产品、苏州科铭生物酶活生理指标测定类产品、杭州弗德生物蛋白类产品、上海阿拉丁生化试剂青岛宾得生物培养基类、美国科晶耗材、美国巴洛克耗材、梅特勒-托利多-RAININ移液器、中科美菱超低温冰箱、美国Denovix超微量核酸蛋白浓度测定仪、天津欧诺摇床、东胜PCR仪、武汉谷歌蛋白类技术服务。

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青岛科尚生物技术有限公司主营RNA提取试剂盒、超纯RNA提取试剂盒miRNA提取试剂盒细菌RNA提取试剂盒血液RNA提取试剂盒病毒RNA提取试剂盒,欢迎致电:13853842152。

今天科尚员工奉行“进取 求实 严谨 团结”的方针,不断开拓创新,以技术为核心、视质量为生命、奉用户为上帝,竭诚为您提供性价比最高的产品、高质量的无微不至的售后服务。

随着企业的发展,青岛科尚生物将继续按照市场经济的运作规律在发展中不断提升企业整体水平,全面推进企业再造,打造一个现代化新的泰安科尚,站在新的起点上,谱写新的绚丽篇章。

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