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山东试剂参数

发布日期:2017-04-22 作者: 点击:

山东试剂

在特定的温度下,一般是37度,待测物质直接或是间接或试剂中的底物发生反应,使整个液体环境的吸光度或是颜色发生变化,这个变化可能是变深或变淡,根据朗伯比尔定律,然后我们用数字光电设备去监测发生的变化,把颜色转化成电信号再转化成数字,电脑再加以计算,套入我们预先设定好的公式,这样就有结果了。*朗伯比尔定律  又称比尔定律,是光吸收的基本定律,适用于所有的电磁辐射和所有的吸光物质,包括气体、固体、液体、分子、原子和离子。光被吸收的量正比于光程中产生光吸收的分子数目,在我们生化分析上通俗的说就是光通过颜色均匀的液体光被吸收的多少或是颜色的变化和液体中物质的浓度成线性关系。

例如AST和GLU的检测原理:  L-天门冬氨酸+ α-酮戊二酸 —AST— 草酰乙酸+ L-谷氨酸 草酰乙酸+ NADH +H+  —MDH— L-苹果酸+ NAD+ + H2O  NADH在340nm有吸收峰,所以NADH的减少速度就可以反应出AST的含量 葡萄糖 + H2O + O2 —葡萄糖氧化酶—H2O2 + 葡萄糖酸  2 H2O2+ 4-氨基安替比林+酚—过氧化物酶—醌亚胺(红色)+ 4 H2O 生成红色的醌亚胺在500nm波长就可以检测到。

一、分析方法的选择:   

常见的分析方法有:终点法,速率法。  

1终点法:一般分一点终点法和两点终点法,一点法其原理是经过一定反应时间后,反应达到平衡时进行的一点分析。例如:溴甲酚绿法测定白蛋白均用该法。对于反应快的物质选用一点终点分析法。二点终点法,是用二点的吸光度之差进行计算。  

2 速率法:也叫速度法或连续监测法,多数用于酶活力的测定。所有酶活力测定均选用速率法。其原理是根据酶所催化反应的速率来测定酶活力的大小,实际操作时要注意反应的方向,正反应和负反应。

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