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山东试剂厂家的植物基因组DNA提取试剂盒

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山东试剂厂家的植物基因组DNA提取试剂盒

发布日期:2017-04-28 作者: 点击:

山东试剂厂家


山东试剂厂家产品简介:

本试剂盒采用可以特异性结合 DNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统提取植物的基因组DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,能够高效、专一吸附 DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组 DNA 片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的植物基因组 DNA 可用于各种常规操作,包括酶切、 PCR、文库构建、Southern 杂交等实验。

操作步骤:

使用前先在漂洗液中加入无水乙醇, 加入体积请参照瓶体上的标签。 所有离心步骤均为 使用台式离心机在室温下离心。

1、植物组织预处理:取新鲜植物组织(不超过 100mg)或干重组织(不超过 20mg),于液氮中充分研磨至细粉状,让液氮自然挥发。

2、将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有 400ul溶液A、20ul RNase A (10mg/ml)和5ulβ-巯基乙醇的离心管中,充分颠倒混匀,室温放置 10min。

3、加入 140ul 溶液 B,充分颠倒混匀,12000rpm离心10min,将上清转移至新离心管(约400-500ul),注意不要吸入沉淀。

4、加入和上清相同体积的溶液C,充分颠倒混匀,再加入和溶液C相同体积的无水乙醇,此时若出现絮状物,将絮状物吹散后一起加入吸附柱中,12000rpm离心5min,弃废液,一次加不完可分两次加入。

注意:如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象,可向吸附柱中加入 600ul 无水乙醇,并适当延长离心时间。

5、向吸附柱中加入600ul漂洗液(请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放回收集管。

6、向吸附柱中加入600ul漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放回收集管中,12000rpm离心2min。

7、将吸附柱置于室温或50℃温箱放置数分钟,否则残余的乙醇可能会影响后续的实验如酶切、PCR等。

8、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加 50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置1-5min,12000rpm离心2min,即可得到高质量的植物基因组 DNA。

9、(可选)离心所得洗脱液再加入吸附柱中,室温放置2min,12000rpm离心2min。

注意事项:

1、组织应尽量选取新鲜幼嫩样本,富含多糖多酚的组织可能会提取失败,请选用多糖 多酚专用试剂盒。

2、如果试剂盒中的试剂出现沉淀,可在 65℃水浴中融化,不影响使用。

3、洗脱缓冲液的体积不能小于 50ul,DNA 产物应-20℃保存。

相关试剂:

E1020

EB 染色液

D1010

6×DNA Loading Buffer

T1060

50×TAE 缓冲液

T1050

5×TBE

缓冲液

M1060

D2000 DNA Ladder

M1400

1kb DNA Ladder

G8142

GoldView II 型核酸染色剂 (5000×)


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