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青岛科尚生物对红细胞裂解液的使用说明

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青岛科尚生物对红细胞裂解液的使用说明

发布日期:2017-05-05 作者: 点击:

红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer,或称 ACK Lysis Buffer)是一种去除红细胞最简便易行的方法,即用裂解液裂解红细胞,它既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不含红细胞,可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的分离和提取等。

红细胞裂解液

组织细胞样品:

1。新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液;

2。从4℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入3-5ml裂解液),轻轻吹打混匀;

3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液;

4。收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次;

5。如裂解不完全可重复步骤2和3;

6.重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液中进行。

血细胞:

1。新鲜抗凝血,离心弃去上清液;

2。取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液,按1:6-10的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入6-10ml裂解液),轻轻吹打混匀;

3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液;

4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次;

5。如裂解不完全可重复步骤2和3;

6.重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液进行。


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