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山东试剂公司介绍台盼蓝染色法

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山东试剂公司介绍台盼蓝染色法

发布日期:2017-05-07 作者: 点击:

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山东试剂公司介绍台盼蓝染色法

山东试剂台盼蓝:细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。因此常用于检测细胞是否存活。

基本性质

中英文名称:台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝、曲利苯蓝

分子式:

C34H24N6O14S4Na4 分子量

: 960.82 可溶于水(

10mg/ml)  是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。

活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。

台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。

机理

正常的活细胞,胞膜结构完整,

能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。

通常认为细胞膜完整性丧

失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、

快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。

台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,

就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。

台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。

步骤

1、4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml

,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。(也可买Gibco的成品)

2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。

3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。(终浓度0.04%)

4、计数:在三分钟内,分别计数活细胞和死细胞。 

5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。

6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100% 

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