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常见琼脂糖凝胶电泳错误

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常见琼脂糖凝胶电泳错误

发布日期:2018-12-21 作者: 点击:

琼脂糖

根据DNA的应用和大小,琼脂糖类型会影响DNA分辨率。 凝胶强度,凝胶融解温度,和电渗透是选择合适琼脂糖时的重要因素。 Thermo Fisher提供一系列的琼脂糖类型,专为特定片段大小和应用的优化结果而设计。

UltraPure™琼脂糖是具有标准融解温度的多用途琼脂糖,专为常规分离分析而设计。 UltraPure™ 琼脂糖可分离500 bp至23,000 bp范围内DNA和RNA。

UltraPure™琼脂糖1000专为PCR片段和其它短DNA片段提供更高的分辨率的凝胶。 琼脂糖1000更容易操作,因为它具有更强的凝胶结构: 凝胶强度超过1,400 g/cm²。

作为低熔/凝固温度的琼脂糖,UltraPure™低熔点琼脂糖被推荐用于快速DNA凝胶提取方案。 此琼脂糖分离范围为50 bp至1,000 bp。

1. 使用水代替凝胶缓冲液或电泳缓冲液

琼脂糖凝胶配制和电泳通常使用TAE或TBE缓冲液进行。 如果您使用水进行凝胶配制和跑电泳,您的凝胶将在电泳时很快融化。 TAE、TBE和水都是透明的溶液;因此,在配制时请检查容器的标签。

2. 使用了错误浓度的琼脂糖

DNA凝胶电泳所需的标准琼脂糖浓度为1.0%。浓度越高,小条带的分辨率越高;反之,琼脂糖浓度越低,大分子量条带的分辨率和分离程度越高。 如果使用了错误浓度的琼脂糖凝胶,就很难确定DNA条带的可靠性。 当使用低百分比浓度琼脂糖凝胶时要小心;它们往往较软,更容易破损。

3. 颠倒了电泳槽与电源连接线的方向

这是很容易犯的错误,但是如果你不小心颠倒了电泳槽与电源连接线的方向,结果将会非常令人沮丧。 因为样本会向相反方向移动,而且由于上样孔与凝胶的末端很近,您会丢失所有的样本。 开始您的电泳后确保DNA样本以正确的方向进入凝胶;如果您看到您的条带向错误的方向移动,请颠倒电源线的方向。


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