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RIPA 总蛋白裂解液 30

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RIPA 总蛋白裂解液 30

详细介绍

山东试剂厂家

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞、组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解后的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA裂解液有很多配方,按效果来分主要分为强,中,弱三种。本裂解液为RIPA强裂解液,其主要成分为50mM Tris-Hcl,150mM NaCl,1 mM  EDTA-Na2, 1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS。

操作说明:

对于组织样品:

1. 组织块用冷PBS洗涤,去除血污。剪成小块置于匀浆器中。

2. 加入10倍组织体积本试剂(使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂)冰上彻底匀浆。

3. 将匀浆液转移至1.5ml离心管中,振荡。冰浴30min,期间用移液器反复吹打,确保细胞完全裂解。

4. 12000g离心5min,收集上清,即为总蛋白溶液。

对于培养细胞样品:

1. 对于贴壁细胞:

a.用PBS冲洗细胞2-3次。最后一次彻底吸干残留液。

b.加入适当体积的细胞总蛋白提取试剂(使用前数分内加入蛋白酶抑制剂)于培养板、瓶内3-5分

钟。期间反复晃动培养板、瓶,使试剂与细胞充分接触。

c.用细胞刮刀将细胞及试剂刮下,收集到1.5ml离心管中。

2. 对于悬浮细胞:

离心收集细胞,每6孔板细胞加约250 ul细胞总蛋白提取试剂(在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂),振荡。

3. 冰浴30min,期间每10分钟用200ul移液器反复吹打数次,确保细胞完全裂解。

4. 12000g离心5min,收集上清,即为总蛋白。


货 号:G2002

品 牌:谷歌生物

规 格:30ml

保存条件:4℃避光保存,一年有效


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